ELISA試劑盒解凍后建議一次用完
ELISA全稱Enzyme Linked Immunosorbent Assay,即酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定。運(yùn)用了間接法檢測(cè)抗體。
ELISA試劑盒基本原理
1、將特定抗體(一抗)結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫性。一抗是待測(cè)抗體的抗體,識(shí)別待測(cè)抗體。
2、二抗是一種與酶偶聯(lián)的抗體,既保留了其免疫活性,又保留了酶的活性。二抗識(shí)別并結(jié)合待測(cè)抗體。
3、測(cè)定時(shí),固定的一抗先與樣品稀釋液反應(yīng),將樣品中待測(cè)抗體固定;洗滌后再與二抗反應(yīng)。每一步之間都要進(jìn)行洗滌。
4、加入底物,酶作用底物,使之變色。底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物
5、產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺有無(wú)定性或定量分析。
由于ELISA檢測(cè)試劑盒保存的特殊性,使得不少的操作者對(duì)冷凍后的產(chǎn)品產(chǎn)生了疑問(wèn):ELISA檢測(cè)試劑盒被冷凍后再使用有影響嗎?對(duì)此,小編建議ELISA試劑盒解凍后一次用完,并作出解釋:
ELISA檢測(cè)試劑盒的保質(zhì)期一般都是在一年,如果保存得當(dāng)?shù)脑挘粫?huì)出現(xiàn)問(wèn)題的。但不要反復(fù)凍融。當(dāng)然如果是正常的ELISA試劑盒,應(yīng)該放在4左右冰箱保存。
但要注意的是,如果將試劑盒剛從冰箱里面拿出來(lái)就立即使用的話,可能會(huì)影響,其直接的后果是對(duì)一些弱陽(yáng)性標(biāo)本的檢測(cè)出現(xiàn)假陰性。建議:先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20分鐘以上后,再進(jìn)行測(cè)定,以使試劑盒在ELISA檢測(cè)試劑盒使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中,能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度能較快地達(dá)到所要求的高度,以滿足測(cè)定要求。
已開(kāi)封或者使用后,剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,ELISA檢測(cè)試劑盒開(kāi)封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20,避免潮濕。