如何改進(jìn)ELISA試劑盒在實(shí)驗(yàn)中的錯(cuò)誤呢?

更新時(shí)間：2021-07-07

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　　ELISA試劑盒有許多實(shí)驗(yàn)操作步驟,新手操作難免出錯(cuò).其中許多錯(cuò)誤是由不充分的細(xì)節(jié)造成的.有很多方法可以減少這種錯(cuò)誤,比如在做實(shí)驗(yàn)時(shí)少說(shuō)話(huà),以防止唾液掉進(jìn)酶的標(biāo)簽中.當(dāng)然,我們也要學(xué)會(huì)探索自己的問(wèn)題,找出原因.那么,我們?nèi)绾胃倪M(jìn)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中的錯(cuò)誤呢?

　　1 評(píng)價(jià)試劑的實(shí)用性試劑的穩(wěn)定性對(duì)準(zhǔn)確度非常重要.在啟用試劑盒之前,應(yīng)重復(fù)檢測(cè)陰性和陽(yáng)性對(duì)照品和樣品,試劑僅在試劑符合要求后才能使用.

　　2 操作前仔細(xì)閱讀試劑盒說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化操作.不同批號(hào)的試劑不混合.值得改進(jìn)的是,只有經(jīng)過(guò)反復(fù)的試驗(yàn),如洗盤(pán)的數(shù)量,才能加以改進(jìn).

　　3 加樣要準(zhǔn)確快速樣品添加的不準(zhǔn)確度和酶制劑用量的不確定度直接影響顯色效果.此外,顯色深度和A值的確定與顯色劑和終液體的加入量有關(guān),因此樣品的裝載應(yīng)謹(jǐn)慎.需要在一定時(shí)間內(nèi)完成采樣的實(shí)驗(yàn),如果采樣速度慢,會(huì)出現(xiàn)誤差,試劑會(huì)暴露很長(zhǎng)時(shí)間,特別是當(dāng)室溫過(guò)高時(shí),保質(zhì)期會(huì)縮短甚至失效.

　　4 檢驗(yàn)技術(shù)人員應(yīng)具備實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn).檢測(cè)技術(shù)人員能夠熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器儀表,具有一定的總結(jié)和分析問(wèn)題的能力,能及時(shí) 妥善地解決試劑盒實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況.

　　5 洗滌要*洗版不*,酶偶聯(lián)物的背景顏色為假陽(yáng)性.此外,清潔劑應(yīng)該是新鮮的,可以隨時(shí)使用.舊的洗滌劑會(huì)增加背景,也可能出現(xiàn)假陽(yáng)性.

　　6 嚴(yán)控試劑盒實(shí)驗(yàn)反應(yīng)時(shí)間試劑盒反應(yīng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng),酶被滅活,反應(yīng)時(shí)間過(guò)短,酶與血清中的微生物抗原和抗體不能*結(jié)合,產(chǎn)物結(jié)構(gòu)松散不穩(wěn)定,易清洗,易產(chǎn)生假陰性.

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如何改進(jìn)ELISA試劑盒在實(shí)驗(yàn)中的錯(cuò)誤呢?