S100-β蛋白ELISA試劑盒技術(shù)詳解：原理、操作與應(yīng)用

摘要

S100-β蛋白作為神經(jīng)系統(tǒng)損傷和膠質(zhì)細(xì)胞活化的特異性標(biāo)志物，在臨床診斷和科研中具有重要價(jià)值。本文詳細(xì)介紹了S100-β蛋白ELISA試劑盒的技術(shù)原理、操作流程、注意事項(xiàng)及臨床應(yīng)用，為研究人員提供全面的技術(shù)參考。

關(guān)鍵詞：S100-β蛋白、ELISA試劑盒、神經(jīng)系統(tǒng)標(biāo)志物、實(shí)驗(yàn)操作、臨床應(yīng)用

1. S100-β蛋白概述

S100-β蛋白是一種分子量約為10.5kDa的鈣結(jié)合蛋白，主要由中樞神經(jīng)系統(tǒng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞和施萬(wàn)細(xì)胞分泌。作為神經(jīng)系統(tǒng)特異性蛋白，S100-β在細(xì)胞周期調(diào)控、能量代謝和細(xì)胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)維持中發(fā)揮重要作用。

1.1 生物學(xué)功能

• 參與細(xì)胞增殖與分化調(diào)控

• 維持細(xì)胞內(nèi)鈣離子平衡

• 影響細(xì)胞骨架動(dòng)力學(xué)

• 調(diào)節(jié)酶活性

1.2 臨床意義

• 創(chuàng)傷性腦損傷的早期診斷標(biāo)志物

• 阿爾茨海默病等神經(jīng)退行性疾病的監(jiān)測(cè)指標(biāo)

• 腦卒中預(yù)后評(píng)估

• 膠質(zhì)瘤等神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的輔助診斷

2. S100-β蛋白ELISA試劑盒技術(shù)原理

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)是目前檢測(cè)S100-β蛋白常用的方法，具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)勢(shì)。

2.1 雙抗體夾心法原理

本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA技術(shù)：

1. 包被：抗人S100-β單克隆抗體預(yù)包被于微孔板

2. 結(jié)合：樣本中的S100-β蛋白與包被抗體結(jié)合

3. 標(biāo)記：加入生物素標(biāo)記的抗人S100-β二抗

4. 顯色：加入HRP標(biāo)記的鏈霉親和素，TMB底物顯色

5. 終止：硫酸終止反應(yīng)，450nm測(cè)定OD值

S100-β蛋白ELISA試劑盒技術(shù)詳解：原理、操作與應(yīng)用

試劑盒性能

1.  檢測(cè)范圍：0.25 ng/mL – 8 ng/mL。

2.  靈敏度：檢測(cè)濃度小于0.1 ng/mL。

3.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

 重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15% 。