血清是常用的
植物Elisa試劑盒標(biāo)本之一,ELISA檢測中血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本中攪擾性物質(zhì)是引起檢測后成果偏高或偏低的主要原因,攪擾性物質(zhì)分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩大類;外源性物質(zhì)常常是因?yàn)橛糜贓LISA測定的血標(biāo)本的收集、儲存等不妥所形成的。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本儲存過久、標(biāo)本凝聚 不全和采血管中添加物等影響。
因?yàn)橹参顴lisa試劑盒各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出許多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為符號的 ELISA測定中,會導(dǎo)致非特異性顯色,攪擾測定成果。
植物Elisa試劑盒標(biāo)本受細(xì)菌污染 :因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可發(fā)作非特異性顯色而攪擾測定成果。
植物Elisa試劑盒標(biāo)本保存不妥 :在冰箱中保存過久的標(biāo)本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可構(gòu)成二聚體,在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、乃至形成檢測OD值偏高;標(biāo)本凝聚不全;在ELISA檢測中影響血清血漿樣本的要素許多,在考慮試劑要素和操作要素之外,也應(yīng)從標(biāo)本要素方面進(jìn)行剖析。
常見的植物Elisa試劑盒攪擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原本身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體、穿插反響物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
植物Elisa試劑盒類風(fēng)濕因子 :血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子(RF)在ELISA檢測中,可與ELISA體系中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結(jié)合,然后導(dǎo)致檢測OD值偏高。補(bǔ)體:ELISA體系中固相一抗和符號二抗過程中,抗體分子發(fā)作變構(gòu),其FC段的補(bǔ)體C1q分子結(jié)合位點(diǎn)被露出出來,使C1q 能夠?qū)⒍哌B接起來,然后形成檢測OD值偏高。嗜異性抗體;人類血清中含有能與嚙齒類動物(如鼠等)Ig (s) 結(jié)合的天然嗜異性抗體,可將ELISA體系中一抗和二抗連接起來,也能形成檢測OD值偏高。
此外血清中嗜靶抗原本身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體、穿插反響物質(zhì)及血清中脂質(zhì)過高、膽紅素、血紅蛋白及血液粘度過大等,均對ELISA測定成果有攪擾效果。
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植物Elisa試劑盒樣品處理和保存關(guān)鍵:
1、留神防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血,血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有相似過氧化物的活性。
2、植物Elisa試劑盒樣本的收集及血清別離中要盡量防止細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長,其所排泄的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化作用,二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作符號的測定方法發(fā)生非特異性煩擾。
3、血清標(biāo)本如是以無菌操作別離,則能夠在2——8℃下保存一星期,如為有菌操作,則主張冰凍保存,樣本的長期保存,應(yīng)在-70℃以下。
4、冰凍保存的血清標(biāo)本須防止因停電等形成的重復(fù)凍融。
5、標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)細(xì)菌污染所形成的的混濁或絮狀物時(shí),應(yīng)堆積后取上清檢查。