丙酮、乙酰乙酸和β-羥丁酸(β-Hydroxybutyrate, β-HB)統(tǒng)稱為酮體(ketone body),當胰島素水平下降到非常低的水平時,發(fā)生糖尿病酮癥酸中毒,關(guān)閉葡萄糖供給身體。生理反應(yīng)是由脂肪酸氧化產(chǎn)生的乙酰輔酶A產(chǎn)生酮體(主要是β-羥基丁酸酯,占75%以上)。酮體生產(chǎn)率非常高,超過了身體利用它們作為能量來源的能力,血液濃度越來越高,稱酮血癥(ketonemia)。過多的酮體從尿中排出,稱酮尿(Ketonuria)。因酮體中除丙酮外,均為強酸物質(zhì),過多的酮體由尿排出時,必須與體內(nèi)堿儲(主要是Na+)結(jié)合成鹽類,因此體內(nèi)堿儲消耗過多,zui后導(dǎo)致代謝性酸中毒及脫水,這種病理變化稱為酮癥(Ketosis)。
如何檢測樣品中β-羥丁酸的含量的試劑盒呢?
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原理:將目標抗體包被于微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的目標連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入微生物化的目標抗體,將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
β-羥丁酸試劑盒啟用后,按照要求條件保存各個組分,并在6個月內(nèi)用完。
β-羥丁酸試劑盒特點:
1、步驟簡單,只需50分鐘
2、檢測范圍:15 μmol/L – 480 μmol/L
3、樣品類型:血清,血漿,細胞裂解液,尿液
Tips:
1、推薦使用肝素(Heparin)收集血液
2、對于樣品可能存在的檢測干擾物,建議使用10kDa的超濾管,過濾,收集澄清的樣品
3、血清樣品可直接檢測,其它樣品需要做梯度稀釋,確保檢測結(jié)果在標準曲線范圍內(nèi)
引用文獻
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