技術(shù)文章/ Technical Articles
ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項技術(shù)自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。(一)原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌...
ELISA試劑盒是一種十分常用的定性定量方法,人體和動物、體外細胞培養(yǎng)中超過80%蛋白定量都使用其作為檢測的手段。ELISA試劑盒價格一般非常昂貴,但各家試劑公司的質(zhì)量卻良莠不齊。ELISA的試劑盒有用于科研的,也有用于臨床診斷的。應(yīng)用于臨床診斷的試劑盒必須有衛(wèi)生部的許可文號,國家對應(yīng)用于臨床診斷的試劑盒有嚴格的規(guī)定和要求,制定相關(guān)的手則來管理試劑盒的質(zhì)量。仔細閱讀說明書,對說明書的內(nèi)容有一個詳細的了解。審查內(nèi)容包括:1.試劑盒的名稱:ELISA試劑盒名稱一般由“(物種)+(...
ELISA實驗中是以抗原和抗體的免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),ELISA試劑以及各種溶液如何配置?zui近剛做了下ELISA實驗,把各種ELISA配置方法匯總?cè)缦拢?、ELISA實驗包被緩沖液2、ELISA實驗洗滌緩沖液3、ELISA實驗稀釋液4、ELISA實驗終止液5、ELISA底物緩沖液6、ELISA實驗TMB四甲基聯(lián)苯胺、使用液7、ELISA實驗ABTS使用液8、ELISC試劑1、ELISA實驗包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液):NaHCO31.59gNaHCO32.93...
如果實驗君的實驗樣品為昆蟲ELISA試劑盒樣品,那么要選擇一個合適的試劑盒相對容易,但如果您的實驗樣品來源于其他物種如雞、牛、猴等,則市面上能提供的試劑盒種類卻很少。且不可輕信能提供近萬種試劑盒,覆蓋多物種的供應(yīng)商。但如果又非要檢測這些物種的指標(biāo)時,要對待檢物(如有種屬差異性)進行同源性分析以及試劑盒的種屬交叉反應(yīng)數(shù)據(jù)。對于樣品類型而言,一般的商業(yè)化試劑盒都經(jīng)過血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清液的驗證。在選擇試劑盒時,要詳細閱讀說明書,比如血漿樣本抗凝劑的使用是否與試劑盒兼容。另外,...
ELISA試劑盒又稱為酶聯(lián)免疫試劑盒,是現(xiàn)在很多生物制藥廠和醫(yī)療實驗室常用的檢測設(shè)備,主要的試驗方法就是酶聯(lián)免疫吸附方法。ELISA是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應(yīng)結(jié)合起來的一種微量分析技術(shù)。酶標(biāo)記抗原或抗體以后,既不影響抗原抗體反應(yīng)的特異性,也不改變酶本身的活性。因為ELISA試劑盒價格低廉且準(zhǔn)確性搞、反應(yīng)時間短等優(yōu)點,所以適合大批量的檢測,一般常常用于食品安全檢測方面。食品安全檢測ELISA試劑盒的操作原理:ELISA的操作步驟:樣品收集保存、試劑準(zhǔn)備、溫育、洗板...
1.不同試劑廠家的ELISA試劑盒所用包被抗原的差異:目前抗HCV檢測ELISA試劑盒均采用HCV的基因工程或合成多肽抗原(核心區(qū)、NS3、NS4和NS5等)包被固相,以間接法進行測定,由于上述HCV抗原的組合、來源及用量等方面的差異。2.所用包被抗原成分相互之間抗原決定簇的覆蓋,這種覆蓋將嚴重影響ELISA測定的敏感性。
ELISA實驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在科研上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。下面將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題解決辦法總結(jié)如下:試劑要選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。標(biāo)本收集與保存:避免使用肉眼可見的溶血標(biāo)本、高脂標(biāo)本和混濁標(biāo)本;2-8℃下,標(biāo)本可放置24-48小時,長期保存需放置-20℃下,請避免反復(fù)凍融。具體請參照:1.洗滌液:用前配制,...
根據(jù)實驗物種及待檢樣品性質(zhì)來選擇上海ELISA試劑盒如果實驗君的實驗樣品為人、小鼠或大鼠樣品,那么要選擇一個合適的上海ELISA試劑盒相對容易,但如果您的實驗樣品來源于其他物種如雞、牛、猴等,則市面上能提供的試劑盒種類卻很少。且不可輕信能提供近萬種試劑盒,覆蓋多物種的供應(yīng)商。但如果又非要檢測這些物種的指標(biāo)時,要對待檢物(如有種屬差異性)進行同源性分析以及試劑盒的種屬交叉反應(yīng)數(shù)據(jù)。對于樣品類型而言,一般的商業(yè)化試劑盒都經(jīng)過血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清液的驗證。在選擇試劑盒時,要詳細...
本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定植物組織等相關(guān)液體樣本中磷脂酸(PA)的含量。實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中植物磷脂酸(PA)水平。用純化的植物磷脂酸(PA)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入植物磷脂酸(PA),再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物磷脂酸(PA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在4...
上海ELISA試劑盒技術(shù)可用于測定抗原,也可用于測定抗體。ELISA方法中有三個必要的試劑:(1)上海ELISA試劑盒固相的抗原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);(2)上海ELISA試劑盒酶標(biāo)記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate);(3)上海ELISA試劑盒酶反應(yīng)的底物。一般可將上海ELISA試劑盒分為以下幾種類型,實驗君首先需要根據(jù)自己的待檢物來確定試劑盒類型。1)雙抗體夾心法:針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相捕獲...
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